基本概念

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本解释

1 . 真核生物 mRNA的3’端都有一段） ，这种尾巴不由基因编码，而是在 转录后加到mRNA上的。加尾过程受位于终止密码3’端的加尾信号序列所控制。

现在知道，动、植物基因都有一个以上 加尾信号序列，动物 基因的同感序列为AATAA，植物基因的加尾信号变化较大为ATAATAApu。

2 . “高等真核生物的细胞核病毒mRNA在靠近3'端都有一段非常保守的序列AAUAAA，这一序列离多聚腺苷酸加入位点距离不一，大致在11-30个核苷酸范围内。将病毒转录单位的该序列删除后，原来位置上不再发生切断和多聚 核苷酸化。”

7张 加尾信号图册

7张 加尾信号图册

英文翻译

加尾信号：【英文翻译】

polyadenylation signal

摘要

目的研究正向和反向SV40poly(A)信号在3种常用细胞株中对上游基因表达的调控作用,为基因表达研究中载体poly(A)信号的选择提供依据。方法将F-Luc与R-Luc两种荧光素酶基因插入同一质粒,构建带有双荧光素酶报告基因的载体Dual-Luc。在F-Luc基因后分别插入正向和反向互补的SV40poly(A)信号序列,得到2个带有不同SV40poly(A)信号的载体Dual-Luc2、Dual-Luc3。将其分别转染常用的3类细胞株293、L-02和HeLa细胞,应用双荧光素酶标仪和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定报告基因(F-Luc)的表达量,以R-Luc基因的表达量作对照。结果成功构建携带正向和反向互补SV40poly(A)序列的双荧光素酶载体Dual-Luc2、Dual-Luc3;双荧光素酶标仪检测表明,在293细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为3.25±0.43、3.03±0.14,差异无统计学意义(P0.05);在L-02细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为6.16±0.39、3.83±0.39,差异有统计学意义(P0.05);在HeLa细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为1.21±0.10、0.66±0.02,差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR检测与荧光素酶检测结果一致。结论不同细胞中poly(A)信号序列对上游基因的调控作用存在差异;poly(A)信号对上游基因的调控作用主要发生于转录水平。

6张 加尾信号图册

7张 加尾信号图册