植物体细胞杂交
植物体细胞杂交(plant somatic hybridization),又称原生质体融合(Protoplast fusion )是指将植物不同种、属,甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合,然后进行离体培养,使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁,未脱壁的两个细胞是很难融合的,植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合,所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。
基本信息
- 中文名
植物体细胞杂交
- 外文名
plant somatic hybridization
- 别名
原生质体融合
- 进展
1960年
- 分类
对称
- 属于
细胞杂交
简介
重要进展
1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;
1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;
1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;
1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种,这也是第一个植物细胞杂种;
1974年,Kao将聚乙二醇诱导融合法应用于植物细胞融合并建立了相应的融合技术;
1978年,Melchers获得了第一个属间细胞杂种(番茄+马铃薯);
1981年,Zimmerman发明了电融合仪,并首次提出了电融合概念;
1987年,Schweiger建立了单对原生质体电融合技术程序!
1991年,R.Wiegand和R.W.Steubing等利用光镊将大鼠的B-淋巴细胞与骨髓瘤细胞对接,形成预杂种,再利用UV激光微束照射,使膜消失并完全融合,形成杂交细胞。
分类
根据融合时细胞的完整程度,原生质体融合可分为两大类:
对称融合(symmetric fusion)-即两个完整的细胞原生质体融合。
非对称融合(asymmetric fusion)-利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合,它可以分为几种:
用于细胞核或细胞质失活的方法分为物理和化学两大类:
物理方法常采用射线处理,如X射线、射线等,它们能使细胞核失活;还有离心,振动,电激等。
化学处理目前常用的试剂有聚乙二醇(PEG)诱导融合,核失活-碘乙酰胺(IOA)、碘乙酸(Iodoacetate);质失活-罗丹明(R-6-G,它是一种亲脂染料,能够抑制线粒体的氧化磷酸化过程而达到失活作用。