药物特点及作用机理

尿激酶与链激酶

尿激酶（uK）可从人尿中提纯或由培养的人胚胎肾细胞分泌而得。它是由两条分子量分别为20kDa、30kDa的多肽链，通过二硫键相连组成的一种丝氨酸蛋白酶。uK有s1（31kDa）和s2（32kDa）两种分子形式，s1是s2的蛋白降解产物。

uK直接作用于pg上arg561-Val562肽键，肽键断裂后，产生由二硫键相连的双链活性分子pm，从而水解构成血栓的不溶性fn，起到溶栓作用。uK无抗原性，为其优点。

链激酶（sK）是由β溶血性链球菌分泌的蛋白酶。它是分子量为47kDa的单链蛋白，氨基末端为异亮氨酸（ile），羧基末端为赖氨酸（lys）。sK在血液中与pg以等摩尔比结合，形成sK·pg复合物。复合物中pg的活性位点通过分子转位暴露在外，从而将pg激活为pm，最后发生纤溶反应，降解血栓。

现在可从类马链球菌中分离sK基因，转入大肠杆菌表达，以获得有溶血栓活性的sK。现已可用基因工程技术大规模制备sK制剂。

进入血循环中的uK和sK均可立即激活纤溶系统，因此在药物未到达血栓部位之前，就激活pg成pm，引起血中纤维蛋白原（fg）水平明显下降。同时，由于pA的快速抑制物pAI1，2（pAinhibitor1,2）和α2抗纤溶酶（α2aP）的作用，迅速与之结合，并中和pA活性，使得药物半衰期很短，在血浆内消除较快，因此，临床治疗剂量也很大。

茴香酰纤溶酶原-链激酶活化复合物（aPSAC）

aPSAC是将pg与sK用苯甲酰类化学试剂（如aPAN）以1:1等分子共价结合形成的pg-SK偶联复合物。复合物中pg上的活性中心（即轻链的ser740位）被可逆地酰基化，以减缓pm的形成，以及免受α2aP的中和与防止过度激活血栓周围以外的pg，降低出血倾向。

由于复合物中pg上与fn有特异亲和性的赖氨酸结合位点（lBS）仍暴露在外，故sK-Pg复合物可富集于血栓部位。连接在fn上的aPSAC以一定速率脱酰化，从而形成pm，溶解fn，消除血栓。

同时，sK与pg的偶联，掩蔽了sK的抗原位点，从而降低其免疫原性。而且，aPSAC的半衰期也较sK长。另外，在血栓位点的脱酰化作用加强了复合物的fn特异性，防止复合物自我消化作用。动物血栓模型证明，aPSAC比未经酰化修饰的pg·sK复合物具有更显著的溶血栓效果。

组织型pA（t-PA）及其突变体

t-PA是分子量为70kDa的单链糖蛋白，来源于人体。在pm或胰蛋白酶作用下，t-PA的arg275-Ile276肽键断裂，形成由二硫键相连的双链。t-PA的羧基端为轻链（32kDa），属丝氨酸蛋白酶样结构域（p），是催化活性中心。氨基端则为重要链（36kDa），由f、eGF、k1、和k2四个结构域组成。

单链及双链t-PA具有相同的激活pg特性。当出现血栓时，t-PA就能迅速激活pg为pm溶解血栓，其机理是：t-PA通过k2及f能特异性地连接至fn上，连接t-PA的fn/血栓增加了对pg的亲和性，形成t-PA·pg·fn环状三元复合物[3]。被激活的pm迅速降角血栓fn。

另外，研究表明t-PA在血液中与pAI-1形成复合物后被中和、降解，在肝脏代谢。因此，其在体内被很快消除，半衰期仅为4～8分钟。为此，研究者利用基因工程技术改变t-PA，来改善药物动力学或功能性质。

目前国外已得到多种重组t-PA（rt-PA）突变体。缺失f、e和k1，仅存k2和p结构域，即只保留特异性结合位点及催化活性中心，得到的bM06.022是一个非糖基化突变体，在体内半衰期延长4～5倍。替代或缺失一个或几个f、e结构域中的氨基酸也起到良好效果，如用ser替代e区cys84，其半衰期可由原来的6分钟延长至20分钟。又如，asn、glu（ala）4分别替代thr103、asn117、lys296-His-Ary-Arg得到的rt-PA-TNK在血液中被消除的时间延长8倍，对fn特异性增强。抗pAI-1能力增强200倍。

单链尿激酶型pA（scu-PA）及嵌合体

scu-PA又称尿激酶原（pro-UK），它是双链uK的酶原前体，是一种低uK活性的糖蛋白。在pm的激活下易发生肽键lys158-Ile159裂解，生成有活性的双链形式。

当血浆中不存在fn时，scu-PA由于受到α2aP的竞争性抑制作用，比较稳定，不会激活pg；但是，一旦产生血栓，因scu-PA对连接于fn上的pg亲和力高于游离pg，从而诱导特异性血栓溶解。并且，fn的降解片段（e-2）能选择性地促进scu-PA对pg的激活，这种促进作用是通过增强pg与已部分降解的fn的偶联来实现的。