Rh血型鉴定
Rh血型鉴定一般指Rh系统中D抗原的检测,根据病人红细胞是否带有D抗原,分为Rh阳性和Rh阴性。
简介
中国汉族人的Rh阴性率为0.34%,绝大多数人为Rh阳性,故由Rh血型不合引起的输血反应相对较ABO血型少。
Rh血型系统一般不存在天然抗体,故第一次输血时,不会发现Rh血型不合。但Rh阴性的受血者接受了Rh阳性血液后,可产生免疫性抗Rh抗体,如再次输受Rh阳性血液时,即可发生溶血性输血反应。
Rh阴性母亲孕育胎儿为Rh阳性,胎儿的红细胞经胎盘进入母体,刺激母体产生抗Rh抗体,再经胎盘进入胎儿体内,由于第一胎产生的抗Rh抗体很少,极少发生新生儿溶血病。第二次怀孕Rh阳性胎儿,所产生抗Rh抗体增多,可致新生儿溶血病。若Rh阴性孕妇曾输过Rh阳性血液史,或第一胎因Rh血型不合流产史,即令第一胎也可发生胎儿溶血病。
用品准备
Rh试剂血清:抗C、抗E、抗D、抗c、抗e;pH5.5磷酸盐缓冲液;蛋白水解酶(如波萝酶);37℃水浴箱;待检者红细胞,各型阴、阳性对照红细胞。其他材料同ABO血型鉴定。
方法操作
蛋白水解酶法
(包括菠萝酶、木瓜酶、无花果酶、胰蛋白酶等) 以菠萝酶介质法为例:
⑴取菠萝酶1g,加pH5.5磷酸盐缓冲液100ml,充分振摇混匀,置37℃水浴箱30min,离心沉淀后取上清液即1%菠萝酶液。放置4℃冰箱贮存。
⑵待检者红细胞及对照红细胞用生理盐水洗涤1次(有溶血的红细胞除外),配成5%红细胞悬液。
⑶取小试管15支,分3排,每排试管按C、c、D、E、e顺序标记。
⑷每排第1管加抗C血清,第2管加抗c血清,第3管加抗D血清,第4管加抗E血清,第5管加抗e血清各1滴。
⑸第1排各管加待检者红细胞悬液各1滴,第2排加阳性对照红细胞,第3排加阴性对照红细胞。
⑹每排各管加1%菠萝酶液1滴。
⑺混匀,置入37℃水浴箱中1h观察结果,若无凝集,应查找原因。
结果判读:?
⑴倾斜试管肉眼观察,先看阳性对照管应凝集,阴性对照管不凝集,再看待检者的试管有凝集者为阳性,无凝集者为阴性。如肉眼观察有疑问者再做镜检。