• 1.摘要
  • 2.基本信息
  • 3.简介
  • 4.特点

单光子检测

单光子检测是将具有高灵敏度的光子测定技术与高特异性的反应结合起来,用以检测物质的分析技术。

基本信息

  • 中文名

    单光子检测

简介

单光子检测是近十年来在国内外最流行的检测技术,其灵敏度、准确性均要高于酶联免疫分析技术,适用于实验室,具有一定的标本数量与日常测试的需求的单位。

特点

海尔曼首先将单光子应用于免疫分析的创建,发展至今已经成为一种成熟的、先进的超微量活性物质检测技术,是医学和生物学领域中重要的检测手段之一,应用范围非常广泛。它主要优点有:

(1)高灵敏度:由于不需要外来光源,避免了瑞利散射和拉曼散射等干扰,因而具有比荧光法更高的信噪比,其灵敏度比RIA或EIISA高100~1000倍,可达10-16mol/L。如单光子底物可检测出的碱性磷酸酶的浓度比显色底物要灵敏50万倍。即使在不需要高灵敏度的指标下,由于技术有了冗余量,使得操作与反应时间进一步缩短。

(2)检测范围宽;单光子具备宽的线性动力学范围,强度在4~6个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系,因而理论上可以检测浓度范围为1~10000倍。相对而言,酶联免疫分析吸光度(OD值)为0.05~2.0,一般检测范围只有1~40倍,优势明显。在实际使用中,实验员就减少了因为标本浓度过高而需要反复稀释标本与重复实验的工作量。

(3)误差与变异小。显色反应通过透射来检测,受溶液的均一性影响,检测变异在4%左右。而采用单光子检测的方式,基本没有检测变异。因而单光子分析检测的误差与变异较小,或称为重复性好、精密性好。

(4)安全性好。早期的放射免疫有放射性危害,需要专门的实验室。酶联免疫的OPD、TMB等显色底物均被认为是致癌物,而实验中使用的高浓度硫酸对人体及环境都有较大的影响,需要小心操作。单光子分析检测则没有这方面的问题。

(5)各种分析检测技术均有其优缺点,对比如下:

表一:分析技术比较(酶联免疫、胶体金、单光子)

酶联免疫

胶体金快检卡

单光子

操作时间

0.5-2小时,再加显色10分钟

极短,5-10分钟左右

0.5小时

危害

底物致癌,浓酸污染

误差及变异

10%-20%

15%-30%

2%-5%

灵敏度