核周型抗中性粒细胞胞浆抗体检测
抗中性粒细胞胞浆抗体(mllineutrophilcytoplasmicantibodies,ANCA)是指与中性粒细胞及单核细胞胞浆成分发生反应的抗体。对血管炎的诊断、分类、疗效观察、病情活动、复发和预后具有重要意义。根据间接免疫荧光法,可将ANCA分为胞浆型(cANCA)、核周型(pANCA)和不典型(xANCA)。其中,核周型抗中性粒细胞胞浆抗体的靶抗原主要为中性粒细胞嗜天青颗粒中的髓过氧化物酶(MPO)。
原理
用中性粒细胞作为抗原片,待检血清中的抗中性粒细胞胞浆抗体与中性粒细胞胞浆结合,洗片后加入荧光素标记的抗人IgG,反应后洗片,用荧光显微镜观察荧光图像。
标本采集
1.患者准备检查前一天晚上8点后避免进食和剧烈运动。患者采血前最好休息15分钟以上。2.标本类型常规采集患者空腹静脉血液4ml置于无抗凝剂的一次性真空采血管中备用。3.标本运送标本采集后应明确标识并由专人及时送检,并注意运送过程中的生物危害性。4.标本处理(1)标本置于37℃孵箱孵育待血液完全凝固后离心分离血清,并进行检测。(2)分离血清,4℃可保存3天或-20℃冰冻保存较长时间。冰冻保存后不能反复冻融。
临床意义
pANCA阳性多见于结节性或显微镜下多动脉炎、溃疡性结肠炎、伴有血管炎的快速进行性肾小球肾炎、嗜酸性肉芽肿性血管炎(CSS)、慢性自身免疫性肝炎等,阳性率达70%~80%。疾病活动时pANCA滴度升高,但肉芽肿性血管炎中pANCA少见阳性。pANcA阳性者血管病变较严重,常多系统受累,预后较差。
参考值范围
MPO<20RV/ml。(酶联免疫吸附法)
注意事项
pANCA阳性的荧光模型应注意与抗核抗体相区别。在乙醇同定的中性粒细胞抗原片中,抗核抗体表现为整个细胞核的荧光,而在甲醛同定的中性粒细胞抗原片中,抗核抗体不引起细胞核的荧光反应。