• 1.摘要
  • 2.基本信息
  • 3.基础定义
  • 4.应用举例
  • 5.演绎过程
  • 6.薄层色谱
  • 7.影响因素
  • 8.层析定义
  • 9.参考资料

比移值

色谱法表示组分移动位置的参数

比移值是指薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值 。又称Rf值,是色谱法中表示组分移动位置的一种方法的参数。定义为溶质迁移距离与流动相迁移距离之比。在一定的色谱条件下,特定化合物的Rf值是一个常数,因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。

基本信息

  • 中文名

    比移值

  • 别名

    Rf值1

  • 释义

    溶质迁移距离与流动相迁移距离之比

  • 外文名

    Rf Value(Retention Factor Value)

  • 作用

    平面色谱专业词汇

基础定义

薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值 。

又称Rf值,是色谱法中表示组分移动位置的一种方法的参数。定义为溶质迁移距离与流动相迁移距离之比。在一定的色谱条件下,特定化合物的Rf值是一个常数,因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。   

应用举例

例如把葡萄糖和果糖在20℃下于正丁醇-醋酸-水(4∶1∶5)中展开,可分别得到0.18、0.23的Rf值,在醋酸乙酯-吡啶-水(2∶1∶1)中展开,则分别得到0.28、0.32的Rf值。若滤纸、溶剂温度等保持恒定,则各种物质呈现特定的Rf值,成为鉴定物质的极重要的常数。

演绎过程

比移值

取本品粗粉约1g(同时另取本品粉末测定水分),精密称定,置索氏提取器中,加氯仿100ml,加热回流6小时,提取液浓缩至适量,转移至25ml量瓶中,加氯仿至刻度,摇匀,作为供试品溶液。另取靛玉红对照品适量,精密称定,加氯仿制成每lml含0.07mg的溶液,作 为对照品溶液。精密吸取供试品溶液10μl或15μl,对照品溶液4μl与18μl,分别交叉点于同一硅胶G薄层板上,以苯-氯仿-丙酮(5:4: 1)为展开剂,展开,取出,晾干,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板,周围用胶布固定,进行扫描,波长:λs=540nm,λR= 700nm,测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值,计算,即得。本品按干燥品计算,含靛玉红(C18H10N2O2)不得少于0.080%。

1. 本品粉末进行微量升华,可得兰色或紫红色小针晶、片状或簇状结晶。

2. 薄层层析 (1)商品大青叶 (2)商品大青叶 (3)靛玉红 (4)靛蓝 样 品 液:取本品粉末0.5g,加氯仿20ml,置水浴中回流1小时,滤过,滤液浓缩至1ml, 作为供试品溶液。 对照品液:取靛玉红与靛蓝,加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液,作为对照溶液。 展 开:苯-氯仿-丙酮(5:4:1) 显 色:日光下检视,供试品色谱在与对照品相应的位置上,显相同的色斑。

薄层色谱

比移值

薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱。

薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,将样品点成一条线,则可分离多达500mg的样品。因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外,在进行化学反应时,薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。

薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂,待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上,凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。

影响因素

1、做TLC时,在展开剂一定时,温度对于分离度的影响特别明显,在20度时好,在30度时不一定好,有时候很不好。笔者在做黄芪时就碰到这样的问题。一般来说,20度时要好。

2、Rf值和展开剂的极性相关,Rf太小,则把极性调大点;Rf太大,就把极性调小。

和被测物质极性、展开剂极性有关,也和固相吸附剂的吸附能力、洗脱剂的洗脱能力有关。