氯霉素检测
氯霉素属广谱抗生素,曾在畜牧业中广为应用。但氯霉素有较强的副作用和毒性作用,如果氯霉素在食用动物中残留,可通过食物链传给人类,长期微量摄入氯霉素,不仅使人体肠道正常菌群失调,而且还会引起多种疾病,对人类的健康造成危害。世界上许多国家禁止此药用于生产食品动物,并规定了在畜产品中氯霉素不得检出。
主要方法
氯霉素检测方法包括微生物法、色谱法、免疫测定法。微生物法易操作,费用低,但灵敏度低,特异性差。色谱法精确可靠、灵敏度高,检测极限可达到0. 1μgPkg ,但前处理步骤多,回收率偏低 。免疫测定具有灵敏度高、特异性强、对仪器设备和人员素质要求低以及样品前处理简单等优点,适于现场监控和大规模样品筛选。1
反应原理
ELISA法:
氯霉素酶联免疫检测试剂盒,主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的,换句话说,就是利用酶标记物与样品中的氯霉素与微孔中的抗体进行竞争反应。在整个反应当中,如果样品中的氯霉素残留的越多,相对地就会竞争反应越多的酶标记物,使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少,用TMB底物显色,样品中的氯霉素含量与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出氯霉素含量。
所需仪器
1.酶标仪(配备450nm滤光片)。
2.旋转蒸发仪。
3.匀浆器。
4.振荡器。
5.冷冻离心机。
6.微量移液器:单道20μL、50μL、100μL、1000μL;多道250μL。
7.天平:感量0.01g。
8.氮气吹干装置。
试剂材料
以下所有试剂,均为分析纯试剂;水为符合GB/T 6682规定的二级水。
1.乙酸乙酯。
2.乙腈。
3.正己烷。