• 1.摘要
  • 2.基本信息
  • 3.还原性
  • 4.应用
  • 5.特点
  • 6.作用
  • 6.1.DTT在蛋白纯化和保存中的作用
  • 6.2.DTT对蛋白的稳定作用
  • 6.3.DTT对部分分子二硫键空间位阻的作用
  • 6.4.DTT在电泳中的作用
  • 7.CASNumber27565419
  • 8.配制方法
  • 9.注意事项
  • 10.其他

DTT

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生物技术

DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25,纯度>99%。

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常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近。但DTT价格略高一些。产品来源:上海浩然生物技术有限公司

1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液

【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。

基本信息

  • 中文名

    二硫苏糖醇

  • 分子式

    C4H10O2S2

  • 简称

    DTT

  • 外文全称

    DL-Dithiothreitol

还原性

DTT是一种很强的还原剂,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。

应用

DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA的二聚化。

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DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温加热或加入变性剂,如6M 盐酸胍、8M 尿素或1% SDS)。反之,根据DTT存在情况下,二硫键还原速度的不同,可以判断其包埋程度的深浅。

特点

由于容易被空气氧化,因此DTT的稳定性较差;但冷冻保存或在惰性气体中处理能够延长它的使用寿命。由于质子化的硫的亲核性较低,随着pH值的降低,DTT的有效还原性也随之降低;而Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl(TCEP盐酸盐)可以作为低pH值条件下DTT的替代品,而且也比DTT更为稳定。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液

【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。

DTT:Deloitte Touche Tohmatsu 德勤全球,即德勤会计事务所的上级公司。

作家

DTT

代表作《时光机》

作用

DTT在蛋白纯化和保存中的作用

Cys存在与许多蛋白中,且其中的-SH常作为活性中心发挥作用,或者,两个-SH连接成二硫键,是维持蛋白质高级构象重要桥梁。-SH具有很强的还原性,溶液被溶液中的溶解氧或其它氧化物氧化,从使蛋白失去活性。所以,在蛋白纯化和保存时,在溶液中加入一定量的DTT,以免蛋白-SH被氧化而失活。但这里就有一个矛盾,DTT该加多少量,以使-SH保持还原状态,而使二硫键免遭还原。

DTT对蛋白的稳定作用