基本内容

我们知道，在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参蛋白，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。

常用的细胞总蛋白质内参有GAPDH和细胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。对于一些植物的样本，则需要特别的植物Actin蛋白作为内参。当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H），或者增殖细胞核抗原（PCNA）等为核内参抗体。而在一些特别的针对线粒体作为微环境的研究课题时，需要提取线粒体总蛋白并检测其中的目标蛋白含量，这时候常规的细胞总蛋白内参就不是很合适，我们推荐使用线粒体总蛋白的内参抗体，对于线粒体蛋白的检测，常用COX IV或VDAC1作为内参抗体，这里面COX IV又是被引用最多的线粒体内参。COX IV的检测分子量大约在16kD左右，比较适合用于检测目标蛋白在较大的WB实验。

我们课题组是做凋亡和线粒体方面研究的，经常研究线粒体方面的通道蛋白，一直使用Abbkine的COX IV抗体来做WB，效价挺高的。——武汉大学生科院一客户

COX IV 抗体是小鼠源的单克隆抗体，一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl COX IV抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:4000，最终使用液相当于400ml），要比效价低的1ml的COX IV抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于200ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。

供应COX IV抗体的进口品牌有很多，像Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling（CST）、Millipore等都有相关COX IV抗体提供。但是由于不是专门的标签和内参抗体供应商，因此在性价比上不是最优的选择， 以Abcam为例，其一支100μl COX IV抗体的RMB报价为￥4418；CST的一支100μl COX IV抗体的报价是￥2997。

另外，COX IV 抗体一些国内的供货商也在提供一些分装和贴标，但是在品牌和质量保障上都有不足。国产分装的COX IV抗体在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价也有损失。而原产于国内实验室的GAPDH抗体有些具有较好的检测活性，但是在应用类型上有差距，并且在批次之间的稳定性上较难控制，而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。如果您想买到一支性价比更高，同时也是原装进口品牌的COX IV线粒体内参抗体，那 Abbkine可能会是您的一个重要考虑选项之一。我们向您推荐Abbkine的COX IV单克隆内参抗体Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2)（货 号A01060）。

COX IV抗体是Abbkine公司提供的一种单克隆抗体，克隆号为14Y2。其抗原为KLH偶联的兼具种属通用型和蛋白特异性的COX IV蛋白部分序列。Abbkine的COX IV单克隆抗体（货号#A02060）产品，其价格比Abcam低65%，只有CST的一半价格。可高效的应用于Western Bloting实验，作为线粒体总蛋白的内参定量。一个高效价的抗体不仅影响实验结果的灵敏度，还意味着更高的性价比。Abbkine的COX IV线粒体内参抗体在常规的WB实验里，推荐的起始稀释比率为1:1000，实际在Abbkine的应用中，还有1:5,000甚至更高的稀释比率，需要根据客户具体的实验条件进行进行优化。Abbkine还提供1ml大包装以及更大定制规格的COX IV线粒体内参抗体，非常适合经常进行线粒体领域免疫学检测的实验需求。为方便客户的使用， 上述产品，Abbkine均在中国备有现货。Abbkine针对中国市场，提供全球化的产品质量追踪和售后服务以及保障，如果您在使用过程中有任何问题， 请直接与其当地代理商艾美捷科技有限公司联系。