• 1.摘要
  • 2.简介
  • 3.基本资料
  • 4.特点
  • 5.应用

amv

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一种逆转录酶

AMV是一种逆转录酶的名称。

简介

AMV逆转录酶

amv逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒,其方法由houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157kd的αβ全酶。amv逆转录酶经高度纯化,完全无核酸酶污染。amv逆转录酶可用于cdna合成,也可用于rna和dna的双脱氧测序。amv逆转录酶以总rnd或polya+rnd为模板,具有以rna为模板的dna聚合酶活性,dna为模板的dna聚合酶活性和rnaseh酶活性,最适反应温度在42-55℃,最高可达60℃,如果使用焦磷酸钠,最适温度为37-41℃。rtt反应缓冲液根据不同用途可以作为5x或10x反应液使用,同时可抑制rnaseh酶活性。按照标准使用方法可以得到长至10-12kbcdna。rt007amv逆转录酶比普通amv逆转录酶和mmlv逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cdna。

基本资料

反应温度:42-60℃产物长度:10-12kb

来源:禽畜源,全酶

反应效率:5u/reaction

RNase活性:弱,被抑制

特点

1.高灵敏度2、高得率

3.高达60℃的反应温度可有效打开rna二级结构

4.可合成长至10-12kb的cdna

5.rt反应液可适用不同用途

应用

1.1μg helatotalrna在42℃,50℃,55℃,60℃经amv酶逆转录后进行pcr的产物电泳结果2、1μg helatotalrna经amv酶逆转录后扩增不同长度pcr产物的电泳结果,amv酶可以转录长至9.6kb的mrna

3.1μg helatotalrna经以下各种逆转录酶逆转录后(按照各自protocol)进行pcr的产物电泳结果

4.1μg helatotalrna经以下各种逆转录酶逆转录后(按照各自protocol)进行荧光pcr(sybrgreeni)的结果。