• 1.摘要
  • 2.基本信息
  • 3.目标获取
  • 3.1.从基因文库中获取
  • 3.2.利用PCR技术扩增目的基因
  • 3.3.人工合成
  • 3.4.技术比较
  • 4.载体构建
  • 4.1.组成
  • 4.2.功能
  • 4.3.步骤
  • 5.目标导入
  • 5.1.转化
  • 5.2.受体种类
  • 5.3.导入方法
  • 6.检测鉴定

基因工程的基本操作程序

生物基因工程技术中的操作程序

基因工程的基本操作程序指的是生物基因工程技术中的一种操作的程序。

基本信息

  • 中文名

    基因工程的基本操作程序

  • 外文名

    Basic operating procedures of genetic engineering

  • 目标的获取

    从基因文库PCR扩增人工合成

  • 载体构建

    目的基因启动子终止子和标记基因

  • 目标导入

    目的基因进入受体细胞内

  • 检测鉴定

    基因探针法生物学水平鉴定等

目标获取

从基因文库中获取

①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。

②基因文库的种类:1、基因组文库;2、部分基因文库。

利用PCR技术扩增目的基因

①PCR含义:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核糖合成技术。全称是多聚酶链式反应。

②PCR原理:DNA双链复制。

③前提条件:有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。

④扩增过程:目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,在DNA聚合酶的作用下进行延伸,如此重复循环多次。

⑤结果:每次循环后的目的基因的量增加一倍,即成指数形式扩增。

人工合成

如果基因较小,核苷酸序列又已知,可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。

技术比较

DNA复制

PCR技术

基因克隆

场所

细胞核

生物体外

细胞内

解旋酶DNA聚合酶

Taq酶

限制酶DNA连接酶

载体

不需要

不需要

需要

遵循原则

碱基互补配对

碱基互补配对

碱基互补配对

载体构建

组成

1、目的基因;2、启动子;3、终止子;4、标记基因。

功能

1、使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代;2、使目的基因能够表达和发挥作用。