基因工程的基本操作程序
生物基因工程技术中的操作程序
基因工程的基本操作程序指的是生物基因工程技术中的一种操作的程序。
基本信息
中文名
外文名
Basic operating procedures of genetic engineering
目标的获取
载体构建
目标导入
检测鉴定
目标获取
从基因文库中获取
①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。
②基因文库的种类:1、基因组文库;2、部分基因文库。
利用PCR技术扩增目的基因
①PCR含义:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核糖合成技术。全称是多聚酶链式反应。
②PCR原理:DNA双链复制。
③前提条件:有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。
④扩增过程:目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,在DNA聚合酶的作用下进行延伸,如此重复循环多次。
⑤结果:每次循环后的目的基因的量增加一倍,即成指数形式扩增。
人工合成
如果基因较小,核苷酸序列又已知,可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
技术比较
| DNA复制 | PCR技术 | 基因克隆 |
场所 | 细胞核 | 生物体外 | 细胞内 |
酶 | 解旋酶、DNA聚合酶 | Taq酶 | 限制酶、DNA连接酶 |
载体 | 不需要 | 不需要 | 需要 |
遵循原则 | 碱基互补配对 | 碱基互补配对 | 碱基互补配对 |
载体构建
组成
1、目的基因;2、启动子;3、终止子;4、标记基因。
功能
1、使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代;2、使目的基因能够表达和发挥作用。