纤维蛋白溶解酶
纤维蛋白溶解酶(Plasmin,PL)是PLG在其激活物(PA)的作用下产生的,是导致纤维蛋白降解最直接的因子。生理状态下,PL与PLG、t-PA等结合在血管内皮细胞表面,一旦有少量纤维蛋白形成,PLG被激活为PL,后者则在局部将纤维蛋白降解,以避免血栓形成,保证血流通畅。
基本信息
- 中文名称
纤维蛋白溶解酶
- 外文名称
Plasmin、PL
医学检查
分类
血液生化检查 > 酶类测定
原理
纤维蛋白可与染料刚果红结合成不溶于水的复合物,被检血浆中的纤维蛋白溶解酶可水解纤维蛋白释放出刚果红,在酸性条件下刚果红显蓝色,其颜色的深浅与血浆纤维蛋白溶解酶活性成正相关。
试剂
(1)硼酸缓冲液(pH7.8):硼酸6.184g,KOH 7.456g,蒸馏水500ml,0.1mmol/L
NaOH溶液53ml,加蒸馏水至1000ml。
(2)1g/L刚果红溶液:刚果红0.5g加生理盐水500ml。
(3)1mol/L HCl溶液。
(4)50g/L CaCl2溶液。
(5)基质粉制备:血浆与生理盐水、50g/L CaCl2溶液按10∶100∶5比例混匀,37℃水浴60min,用玻棒将纤维蛋白全部卷出,用生理盐水洗涤两次后,挤干,置56℃温箱中烘干备用。取10g纤维蛋白,加1g/L刚果红溶液100ml,37℃水浴中不断搅拌,保温30min,3000r/min离心10min,弃去上清液,用pH7.8硼酸缓冲液反复洗涤至上清无色为止,将与刚果红结合的纤维蛋白置56℃温箱烘干备用。
(6)分光光度计。
操作方法
(1)按表1操作:
(2)离心上述溶液,取上清,分光光度计600nm波长比色,空白调0,测其吸光度值,查标准曲线即可得出纤维蛋白溶解酶活性。
附注:
检测前禁止服用抗凝药物,如阿斯匹林等。