概述

载脂蛋白C是极低密度脂蛋白胆固醇的主要载脂蛋白，也存在于高密度脂蛋白-胆固醇和低密度脂蛋白-胆固醇中，有3种不同的载脂蛋白C，即ApoCⅠ、ApoCⅡ、载脂蛋白CⅢ，它是CM、VLDL他和HDL的少量结构蛋白。

ApoCⅢ测定

分类

血液生化检查 > 脂类测定

别名

载脂蛋白CⅢ

原理

（1）免疫透射比浊法：血清载脂蛋白CⅢ与试剂中的特异性抗人载脂蛋白CⅢ抗体相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生混浊，以光度计在波长340nm测出吸光度，代表混浊程度，浊度高低反映血清标本中载脂蛋白CⅢ的含量，后者可由校准血清所作校准曲线读出。

试剂中聚乙二醇（PEG）有促进抗原抗体反应的作用。载脂蛋白CⅢ主要存在于HDL颗粒表面，血清稀释及表面活性剂有助于HDL 载脂蛋白CⅢ抗原位点的暴露，使之能充分地与特异性抗体起反应，表面活性剂还可减轻血清空白浊度。

（2）火箭电泳法：火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进，通过应用直流电（稳压稳流）使抗原（载脂蛋白CⅢ和B）在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散，pH 8.6时抗原向阳极移动，在泳动途中与凝胶中的抗体反应，逐渐形成类似火箭的沉淀峰。其峰高（或峰面积）与抗原浓度成正比，故可作抗原定量。

试剂

（1）免疫透射比浊法：

①样品稀释剂：pH 7.4的磷酸盐缓冲液（0.01mol/L磷酸盐中含0.15mol/L氯化钠），内含PEG-6000 40g/L及表面活性剂适量（选用聚氧乙烯月桂醚类，如Thesit或Tween-20），用GS玻芯漏斗抽滤后用。本试剂的吸光度A340nm＜0.05，在2～6℃冰箱中可存放半年。如半年后A值仍＜0.05，可继续应用，如＞0.05可按上述条件抽滤后再用。

②羊或兔抗人载脂蛋白CⅢ抗血清：原血清效价以1∶32～1∶64为宜。抗血清可用含PEG-6000的磷酸盐缓冲液（不含表面活性剂）或用硫酸铵沉淀法纯化。抗血清应用液浓度因各批抗血清的效价及免疫亲和力而异（应按试剂盒说明书，临用前稀释）。抗血清中含防腐剂，在2～6℃冰箱中可存放半年。原血清（冻干）在低温冰箱中（－20℃以下）可贮存数年。

③参考血清：现在已有国际标准，即WHO 载脂蛋白CⅢ参考物质SPI-01（冻干血清）。符合国际标准的校准血清由卫生部北京老年医学研究所提供。

校准血清保存在－20℃以下，至少稳定半年，化冻后必须彻底混匀后才能应用。最好备有高、中、低浓度（例如apoAⅠ 2.0，1.3与0.6g/L左右）的校准血清各1份。便于作校准曲线。

（2）火箭电泳法：

①巴比妥缓冲液，离子强度0.05，pH8.6。